| 產(chǎn)品編號(hào) | S0010 |
| 英文名稱 | Acridine Orange solution |
| 中文名稱 | AO染色液(1mg/ml) |
| 別 名 | Acridine Orange staining solution (1mg/ml); AO solution; AO染液(1mg/ml) |
| 保存條件 | 4℃避光保存，有效期12個(gè)月。. |
| 產(chǎn)品介紹 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介： Acridine Orange (吖啶橙,) 屬于三環(huán)雜芳香燃料，可以標(biāo)記DNA、RNA，屬于異染性熒光染料。吖啶橙激發(fā)濾光片波長(zhǎng)488nm。阻斷濾光片波長(zhǎng)515nm。吖啶橙與細(xì)胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別，可發(fā)出不同顏色的熒光（即著色特異性）。該染料具有膜通透性，能透過(guò)細(xì)胞膜，使核DNA和RNA染色。因此AO常用于細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA進(jìn)行檢測(cè)。AO與核酸結(jié)合方式主要有：1、插入性結(jié)合，AO嵌入核酸雙鏈的堿基對(duì)之間，這種結(jié)合方式主要為AO與DNA的結(jié)合，其熒光發(fā)射峰為530nm，激發(fā)后呈綠色熒光；2、靜電吸引，帶正電荷的AO與單鏈核酸的磷酸根(帶負(fù)電荷)產(chǎn)生靜電間的吸引結(jié)合，這種結(jié)合方式主要為AO與RNA的結(jié)合，其熒光發(fā)射峰為640nm，激發(fā)后呈紅色熒光，少量結(jié)合會(huì)呈桔黃色或桔紅色熒光。因此，吖啶橙嵌合到雙鏈DNA分子中顯綠色，與DNA單鏈或RNA結(jié)合時(shí)發(fā)桔黃色或橙紅色熒光。 AO染色液(1mg/ml)為儲(chǔ)存液，使用時(shí)應(yīng)稀釋到合適濃度后使用。AO染色常與EB染色合用雙染，因EB只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光，由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞。AO染色液工作濃度為8.5ug/ml。 使用說(shuō)明： 1. 收集細(xì)胞(采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，應(yīng)先固定細(xì)胞)，用 PBS 清洗細(xì)胞 1 次，計(jì)數(shù)并調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度至 106/ml。 2. 取適量的細(xì)胞懸液，加入 AcridineOrangeStain(1mg/ml)，使 AO 終濃度為 8.5-10μg/ml，輕輕混勻。 3. 室溫避光染色 15-20min，滴加于載玻片上并加蓋玻片或上流式細(xì)胞儀分析。 4. 熒光顯微鏡下觀察(激發(fā)濾光片波長(zhǎng)488nm，阻斷濾光片波長(zhǎng)515nm)，計(jì)數(shù)并拍照。 注意事項(xiàng)： 1. Acridine OrangeStain (1mg/ml) 不含破膜劑，較少單獨(dú)使用。 2. 吖啶橙染色常與 EB 染色合用，可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞。 3. 如有低溫離心機(jī)進(jìn)行離心效果更佳。 4. 操作過(guò)程中應(yīng)注意減少試劑暴露于強(qiáng)光下的時(shí)間。為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液(C02-04003)。 5. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 |
